Hasnyálmirigyrák xenograft modellek.

Népszerű Bejegyzések

A hasnyálmirigy-adenokarcinóma PDA az egyik leghalálosabb emberi rosszindulatú daganat, és nem reagál az aktuális kemoterápiákra. Itt vizsgáljuk a phycocyanin anti-PDA-szer terápiás potenciálját in vivo és in vitro körülmények között. A Phycocyanin, a Spirulina által tisztított természetes termék hatékonyan gátolja a hasnyálmirigyrákos sejtek proliferációját in vitro és az xenograft tumor növekedését in vivo. Az autophagy gátlása azáltal, hogy a Beclin 1-et az siRNS alkalmazásával célozza meg, szignifikánsan elnyomja a sejtek növekedésének gátlását és a phycocyanin által kiváltott halált, miközben az autofágia és az apoptózis gátlása meggátolja a phococyanin által közvetített sejthalált.

Továbbá a phococyanin elősegíti az NF-κB aktiválódását és nukleáris transzlokációját, amely fontos szerepet játszik a phococyanin által közvetített apoptózis és az autózis kiegyensúlyozásában.

Összefoglalva, tanulmányaink azt mutatják, hogy a phococyanin hasnyálmirigy-rákos aktivitást fejt ki apoptotikus és autophagus sejtek elhalálozásával, ezáltal a fikocionint ígéretes hasnyálmirigy-rákos ágensként azonosítja. A hasnyálmirigy-rák a gyengébb prognózisú gasztrointesztinális daganatok egyike. A hasnyálmirigyrák jelenlegi legfontosabb kezelési módjai közé tartozik a sebészeti reszekció, a radioterápia és a kemoterápia.

Ezért sürgősen meg kell érteni a PDA patobiológiáját és új és hatékony terápiás stratégiákat kell kidolgozni. A Phycocyanin, a Spirulina microalga egyik legfontosabb pigment összetevője az alfa alegységből és a 4-es kromofor tartalmú béta alegységből álló oligomerek elegye.

A phycocyanin-t sok országban táplálékkiegészítőként alkalmazzák, amelynek tápértékét jól dokumentálták 5,6. A felhalmozódó bizonyítékok azt mutatják, hogy a fikocionin hatásos rákellenes hatást fejt ki in vitro és in vivo különböző ráksejt típusokra, mint például tüdőrák 7vastagbélrák 8emlőrák 9 és csontvelő rák Ezek a vizsgálatok arra utalnak, hogy a hasnyálmirigyrák xenograft modellek terápiás hatása van a rák kezelésében.

Mechanikusan a phycocyanin rákellenes hatást fejt ki az apoptózis és a sejtproliferáció modulálásával. A Phycocyanin bebizonyosodott, hogy a tumorsejtekben apoptózist indukál ROS előidézésével és a Bcl-2 expressziójának leértékelésével, egy jól ismert 12 anti-apoptotikus molekulával, valamint a mitokondriumok citokróm-citokróm felszabadulásának indukálásával, PARP hasítás A phycocyanin szintén előidézheti az apoptotikus sejtek halálát a Caspase 3 és a Caspase 8 aktivitásának növelésével.

Az mtor (mammalian target of rapamycin) aktivitás jelentősége humán lymphomákban

A halmozódó bizonyítékok kimutatták, hogy az autofágia célzása ígéretes és alternatív stratégia a rákellenes terápia kifejlesztésére A jól ismert pro-túlélési szerepe mellett az autophagy kétélű kardot jelent, és hozzájárulhat a sejtkárosodáshoz is 17, Különösen, az előző jelentések felfedi az összetett áthallást az autofágia és az apoptózis között, és a két folyamatot rendszerint ugyanazok az ingerek indítják el, és hasonló effektorokat és szabályozókat oszthatnak meg Ezek a vizsgálatok azt sugallják, hogy rákellenes terápiás stratégiák kifejlesztése az autofágia és az apoptózis folyamatok szinergista modulálásával lehetséges.

A phococyanin gátolja a sejtek életképességét a tumorsejtekben és kevés hatással van a normál sejtekre.

• Jóindulatú keratosis papilloma
• Absztrakt Háttér: A hasnyálmirigy-rákos betegek rossz prognózisa van a műtétre alkalmas néhány kivételével.
• Nukleáris energia Absztrakt Itt bevezetünk egy gyorsító tömegspektrometriás AMS alapú precíziós módszert a metasztatikus daganatokat indító rákos sejtek számának meghatározására xenograft egerekben.
• A növekedési faktorok, a tápanyagok és a sejtek energiaellátottsági állapotának megfelelően pozitív jeleket továbbít, ezáltal segítve a túlélésért, növekedésért, proliferációért és motilitásért felelős fehérjék és jelutak működését.
• Paklitaxel – Wikipédia
• A cikk javítása
• Papillomavírus elleni vakcina férfi belgium

Különböző ráksejteket kezeltünk 72 órán keresztül növekvő koncentrációjú fikocianinnal. Az eredményeket legalább három független kísérlet átlag ± SD értékével adjuk meg, mindegyiket három párhuzamosan végezzük. Eddig nem hasnyálmirigyrák xenograft modellek a phycocyanin szerepét a hasnyálmirigyrákban, sem a phycocyanin autophagy hatását. A jelen vizsgálatban a fikocyanin anti-hasnyálmirigyrák-hatását humán PDA-ra vizsgáljuk in vitro és in vivo. Azt találtuk, hogy a phycocyanin hatékonyan gátolja a hasnyálmirigyrák sejtszaporodását apoptotikus és autophagus sejtes halál kiváltásával.

Továbbá feltárjuk a phycocyanin által közvetített autophagyban és apoptózisban jelentkező jelátviteli utakat. Eredmények A phococyanin gátolja a sejtek életképességét a tumorsejtekben, és kevés hatással van a normál sejtvonalra.

A fikocyanin daganatellenes hatásának vizsgálatára a fikocyanin hatását figyeltük meg egy panel humán ráksejtvonal sejtek életképességére egy anyagcsere-aktivitáson alapuló CellTiter-GloR lumineszcens vizsgálattal. Amint az az 1A. Amint az 1C. Ábrán látható, a phococyanin szinte nincs gátló hatással a normál sejtekre.

A phococyanin növekedésgátló hatása a PANC-1 sejtekre szintén időfüggő volt, erőteljesebb lett az eltelt idő alatt S1A ábra. A PANC-1 sejtek kolóniaképző képességét a dózisfüggő módon csökkentettük a phococyanin expozíciót követően, és hpv szemölcs fejbőr befejeződött a 20 μM koncentrációban eltörölt 1D. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a phococyanin in vitro gátolja a PANC-1 tumorogenitását.

A phycocyanin in vivo gátolja a hasnyálmirigyrák tumor növekedését. PANC-1 alapú hasnyálmirigyrák xenograft modellek xenograft modellt használtunk a phycocyanin antitumor hatásának in vivo értékelésére.

Amint a 2A. Ábra, S2A ábra. Ezek a megfigyelések összhangban vannak korábbi megállapításainkkal, miszerint a phycocyanin alkalmazása nem okoz májhatást, és in vitro és in vivo 22 védi a szén-tetraklorid által indukált hepatocita károsodást. Összefoglalva, ezek az eredmények arra utalnak, hogy a phococyanin nyilvánvaló hasnyálmirigy daganatos aktivitást mutat nyilvánvaló toxicitás nélkül.

A phococyanin növekedési gátló hatásának potenciális celluláris mechanizmusainak meghatározásához a phococyanin hatását a PANC-1 sejtek sejtciklus-progressziójára teszteltük úgy, hogy a sejtek áramlási citometriás elemzését 72 h-os kezelés után különböző koncentrációjú fikocianinnal végeztük. A phococyanin indukálta sejtciklus leállást egy mérsékelt és dózisfüggő sejt apoptózis kísérte PANC-1 sejtekben 3C-E ábra.

Annak meghatározásához, hogy a phococyanin-indukált sejthalálatot főként az apoptózis okozta-e, megvizsgáltuk a phycocyanin szerepét a PANC-1 sejtekben, az apR-gonin-specifikus gén kaszpáz 3-mal, melyet az siRNS elnémított. A Phycocyanin által közvetített növekedési gátlás szignifikánsan csökkent, mivel nem teljesen fordított volt az NS csoport és az kontroll siRNS csoportéhoz képest 3H.

Ezek az adatok arra utaltak, hogy a PANC-1 sejtekben a phycocyanin által indukált sejthalál csak részben függ a kaszpáz 3 aktivációjától, és további utak is érintettek. A bemutatott adatok három független kísérletet reprezentáltak. E Phycocyanin kezelést követően a korai apoptotikus sejtpopuláció Annexin V-pozitív hasnyálmirigyrák xenograft modellek késői apoptotikus sejtpopulációval PI-pozitív PANC-1 sejtekkel dózisfüggő módon nőtt.

Három vizsgálatból származó átlag ± SD. A kaszpáz 3-nak a siRNS-medence 24 órán át történő leütése, majd a 10 μM-os phycocyanin-kezelés 72 órán keresztül csökkenti a kaszpáz 3 aktiválódását. Az adatok három független kísérletet jelentettek. A phycocyanin által kiváltott sejthalál alternatív mechanizmusának vizsgálata során megvizsgáltuk a phycocyanin Beclin 1 hatását, az Atg6 élesztő emlős orthológját és az autophagy 22 kulcsfontosságú szabályozóját és az autózis at.

A celluláris Beclin 1 szint szignifikánsan megnövekedett idő- és dózisfüggő módon a phococyanin kezelés után 4A, B ábra.

Ezután megvizsgáltuk, hogy a phycocyanin-kezelés indukálta-e az autophagy injekciót a hasnyálmirigy-rákos sejtekben a mikrotubulus-asszociált 1-es fehérje könnyű láncának LC3 celluláris eloszlásának vizsgálatával, az autofagoszómák molekuláris markerjével. A phycocyanin-nal kezelt sejtekben 10 μM az LC3 immunofluoreszcenciájának megkülönböztetett pattanási mintázatát mutatták ki, ami az autophagus vacuolák fokozott képződését jelezte.

Hasnyálmirigyrák xenograft modellek MAP-LC3-pozitív sejtek százaléka szignifikánsan nőtt a különböző hasnyálmirigy-rákos sejtekben a 10 μM-os fikocianinnal végzett kezelést követően a jelzett időpontban 4D.

Az autofagoszómák a lizoszómákkal való érés és fúzió után savanyítással megy végbe, hogy lysosomális hidrolázok tartalmát az autofágia késői stádiumában emésztessék. A fehérje fluoreszcencia leállításához használt DQ-BSA, a proteolitikus enzimek által hasított lizoszomális rekeszekben lehasított BSA származékát használták fel az autophagy progressziójának értékelésére a fikocyanin kezelésre adott válaszként.

A lizoszomális markert, lysotracker Red-et tartalmazó lokálisan lokalizált, zöld fluoreszcens jelek növekedését figyelték meg a phococyanin kezelés után, jelezve, hogy a DQ-BSA hatékonyan hasításra került a phycocyanin jelenlétében. Másrészt, a sejtek egy lysosomotrop ágens kloro-quinnal való együttes kezelése, amely meggátolja az endoszomális savasodást, blokkolja a DQ-BSA 4F. Ábra feldolgozását, és megnöveli a lizoszóma marker lizoszomához társuló 1 membránglikoprotein LAMP- 1 és a katepszin D, a domináns lizoszomális aszpartikus proteáz, amelyet fikocíanin indukál S3 ábra.

A phococyanin szignifikáns autózist indukál a PANC-1 sejtekben. Beclin 1 expresszió Western blot analízise után 0, 2,5, 5, 10, 20 és 40 μM phycocyanin kezelés 12 hpv testszag és 24 óra után. Beclin 1 expresszió Western blot analízise után 3, 6, 12, 24 és 48 h kezelés 10 μM phycocyanin kezeléssel.

C Fluoreszcens képek a hasnyálmirigyrákos sejtekről, amelyek az endogén MAP-LC3 szinteket mutatják különböző időpontokban a hasnyálmirigyrák xenograft modellek kezelés után.

A magokat kék a DAPI jelöli. A fluoreszcens képeket nagy mennyiségű képalkotó rendszerben kaptuk. A hibablokkok három ismétlődő kutak SD-jének felelnek meg.

Tartalomjegyzék

A sejteket 10 μM fikocianinnal kezeltük a jelzett időpontokban. A klorokint a blokkolt lizoszomális aktivitással rendelkező sejtek DQ-BSA emissziójának monitorozásához adjuk.

A sejteket egyidejűleg Lysotracker red LTRred jelenlétében ábrázoltuk a lizoszomális rekesz vizualizálására. Annak meghatározásához, hogy az autofágia szerepet játszik-e a phycocyanin által közvetített növekedési gátlásban és a sejthalálban, a Beclin 1 autophagy-eredetű fehérje expresszióját Beclin-1 specifikus siRNS alkalmazásával elnémítottuk. Amint az 5A.

Fontos megjegyezni, hogy a Beclin 1 lerombolása szignifikánsan elnyomta a PANC-1 sejtek phycocyanin által közvetített növekedési gátlását, és mind a Beclin1, mind a kaszpáz3 siRNS egyidejű beadása a phycocyanin által kiváltott sejtnövekedés gátlás szinte teljes megmentését eredményezte 5D.

Ezek az eredmények azt sugallják, hogy az autophagy fontos szerepet játszik a phycocyanin-indukált PANC-1 sejthalálban.

A bemutatott eredmények legalább három független kísérletet reprezentáltak. Az adatok három független kísérletből reprezentatívak. Kezelések után az IKKβ és Iκ B-a szintjeit és foszforilált formáit Western-blottal, jelzett antitestekkel analizáltuk. Az eredmények három független kísérletet reprezentáltak. Míg hasnyálmirigyrák xenograft modellek phycocyanin kezelés nem befolyásolta szignifikánsan a teljes JNK, p38 és Hasnyálmirigyrák xenograft modellek expresszióját, a phycocyanin növelte a p-JNK és a p-p38 szintjét, és idővel függően csökkentette a p-Erk szintjét 6A.

Vizsgálataink azt mutatták, hogy a phococyanin a Beclin 1 expresszióját indukálta 4A, B ábra. Tekintettel arra, hogy az NF-κB fontos transzkripciós faktor a Beclin esetében, meghatároztuk, hogy a phococyanin aktiválja az NF-κB útvonalat.

Eközben a phycocyanin kezelés időfüggően növelte az NF-κB nukleáris frakcióját anélkül, hogy befolyásolta volna a citoplazmatikus NF-κB-t 6C.

A fent említett jelátviteli útvonalak részvételének további validálása érdekében a megfelelő jelátviteli útvonal blokkolására az NF-κ B SN50 egy NF-κ B transzlokációs inhibitor, SN50 és a PD egy speciális MEK inhibitor részvételének további validálására szolgáltak. Amint a 7C. Ábra, Eés szignifikánsan gátolta a phycocyanin által hasnyálmirigyrák xenograft modellek sejtnövekedés gátlását 7F. Ezekkel a megállapításokkal összhangban a PD kezelés jelentősen gátolta a phococyanin indukálta kaszpáz 3 aktivációt és a PARP hasítást 7G ábra.

A sejteket 10 μM-os fikocianinnel kezeltük különböző időpontokban SNvel 10 μM. A citoszolos és a nukleáris fehérjéket western-blot analízissel alkalmaztuk anti-NF-κ B p65 ellenanyag alkalmazásával. A bemutatott adatok három független kísérletet hasnyálmirigyrák xenograft modellek. Ezek az eredmények összhangban vannak a korábbi vizsgálatokkal, amelyek azt mutatják, hogy a phococyanin képes elnyomni a különböző 7,25,26 tumoros sejtvonal növekedését.

Különös jelentőséggel bír in vitro és in vivo a hasnyálmirigy-rákos sejtek növekedésének gátlása, mivel ez a phycocyanin elsődleges demonstrációja a hasnyálmirigyrákkal szemben, a rák nagyon agresszív és rossz formája, kevés hatékony terápiás lehetőséggel.

Oncology Absztrakt A hasnyálmirigyrák mortalitási és morbiditási rátái rendkívül invazív és áttétes jellegük miatt magasak. Tünetek hiánya, a késői diagnózis és a kemo-rezisztencia, valamint a nem hatékony kezelési módozatok indokolják az új kemoterápiás szerek kifejlesztését a hasnyálmirigyrákban. A gyógynövényekből származó hatóanyagok terápiás előnyöket mutattak ki különféle emberi rákok esetén.

Korábbi vizsgálatok arra utalnak, hogy a phycocyanin rákellenes hatását a sejtek apoptózisának és a sejtciklus leállásának indukálásával fejtik ki 12, Meglepetésünkre azonban méregtelenít thc kaszpáz 3 kaszpáz 3 siRNS génszegényedése csak marginálisan volt hatásos a phococyanin által közvetített növekedési gátlás és a sejthalál elnyomásában.

Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a phycocyanin által közvetített sejtnövekedés-gátlás és a sejthalál mechanizmusa összetett, és hogy az apoptózissal járó egyéb sejtes folyamatok szintén hozzájárulhatnak a fikocyanin daganatellenes aktivitásához. Bár az autofágia programozott II. Típusú sejthalálnak minősül, függetlenül attól, hogy az autofágia ténylegesen elősegíti vagy megvédi a sejteket a haláltól, továbbra is ellentmondásos.

Hogy alakulhat ki a hasnyálmirigy gyulladás? – beszélgetés dr. Hegyi Péterrel - egyetem tv - Tandem

Az autofágia szerepe a sejtvesztésnél nagyobb valószínűséggel járvány-specifikus és attól függően, hogy az autofágia hogyan indukálódik Ebben a hogyan kell kezelni a nyaki papilloma vírust meggyőző bizonyítékot szolgáltattak annak kimutatására, hogy a phycocyanin által indukált autofágia a PANC-1 sejtekben, mint a phococyanin kezelés, idővel és dózisfüggő növekedést eredményezett a Beclin 1, az Atg6 élesztő emlős orthológjának expressziójában, amely központi szerepet játszik a az autofágia indukciója, valamint a jellegzetes autofagoszómák kialakulása.

Fontos megjegyezni, hogy tanulmányunk azt mutatja, hogy az autophagy felelős a phycocyanin indukálta növekedés gátlásáért és a PANC-1 sejtek haláláért, mivel az autophagy gátlása a Beclin1 expresszió elnyomásával nagymértékben negatja a phycocyanin által kiváltott növekedésgátló hatást.

Ezenkívül mind a Beclin 1, mind a kaszpáz 3 elcsendesedése a phococyanin által közvetített sejtes halál majdnem teljes mentesítéséhez vezet. Eredményeink összhangban vannak azzal az elképzeléssel, hogy az autofágia és az hasnyálmirigyrák xenograft modellek gyakran együtt létezik, és egyensúlyt tartanak egymással A ráksejt-apoptózis és az autofágia indukálására alkalmazott molekuláris mechanizmusok és jelátviteli utak meghatározása során hasnyálmirigyrák xenograft modellek is feltárjuk a MAPK jelátviteli utak szerepét.

A MAPK-k JNK, p38 és Erk három alcsaládja közül paraziták üzenete Európának növekedési faktorral aktivált Erk és a stresszaktivált JNK és p38 útvonalak közötti dinamikus egyensúly döntő fontosságú annak meghatározása során, hogy egy sejt túlél vagy apoptózissá válik Eredetileg azt mutatták, hogy az Erksek elengedhetetlenek a sejtek túléléséhez, míg a JNK-k és a pMAPK-k stresszre érzékenyek, és ezért részt vesznek a as apoptózisban.

Összhangban a korábbi irodalmi adatokkal 34,35megállapításaink szerint a phycocyanin aktiválta a JNK és p38 útvonalakat, miközben elfojtotta az Erk jelzést, azt sugallja, hogy a MAPK jelátviteli utak fontos szerepet játszanak a phycocyanin által indukált apoptózisban a rákos sejtekben. Másrészről az emlõs célú rapamicin, az mTOR, az autophagy 36 kulcsfontosságú szabályozójaként ismert.

Az mTOR-útvonal gátlása következetesen társul az autofágia kiváltásában a rákos sejtekben 37, Az akt gátlás csökkenti az mTOR aktivitást és elősegíti az autofágist. A közelmúltban végzett vizsgálatok kimutatták, hogy az apoptózis és az autofágia közötti jelentős különbségek ellenére szabályozásuk szorosan összefügg, és ugyanazok a szabályozók néha hasnyálmirigyrák xenograft modellek mind az apoptózis, mind az autofágia kezelésére Az egyik ilyen szabályozó az NF-κ B jelátviteli út.

It is well known that activation of NF-κ B is capable of inhibiting apoptosis 44—